分子及核酸用酶

Bsu

Bsu DNA Polymerase, Large Fragment是将枯草芽孢杆菌DNA聚合酶I5'→3'核酸外切酶结构域(1-296 aa)删除后表达剩余蛋白序列而获得的。该酶保留了枯草芽孢杆菌DNA 聚合酶I5'→3'聚合酶活性,但是缺失了5'→3'核酸外切酶和3'→5'核酸外切酶活性。Bsu DNA聚合酶大片段具有链置换 (strand displacement)活性,可应用于随机引物法标记、cDNA 第二条链的合成、单个 dA 的加尾、链置换的 DNA 合成等。

重组酶(T4 UvsX Recombinase

UvsX重组酶,来源于T4噬菌体,是RecA/Rad51家族的同源体,在双链DNA断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起到重要作用。 T4 UvsX重组酶可与其他重组酶一起锚定在单链DNA上并激活其在其他双链DNA上寻找同源序列,以进一步完成链置换。该酶无核酸酶活性。

单链结合蛋白

(SSBsingle strand DNA-binding protein),SSB家族在DNA损伤修复过程中具有不可或缺的地位。SSB可以与ssDNA结合,防止其被核 酸酶水解,从而维持单链状态。SSB还能募集相关协同蛋 白质,并为它们呈递底物,从而促进各种DNA损伤修复过程。以上两种功能决定了SSB在各种DNA代谢过程中占据不可或缺的地位。

鉴于SSBDNA双链断裂损伤修复中的作用,可以将其作为新的药物靶点,破坏肿瘤细胞DNA双链断裂损伤修复能力,增加化疗药物的敏感性。同理,还可以通过抑制SSB的活性,增加放疗的敏感性。

Endonuclease IV (Nfo)

 本公司生产的Endonuclease IV来源于E.coli是一种核酸内切酶,又叫Nfo,可参与DNA分子上的几种氧化性损伤。该酶可识别双链DNA分子上的脱嘌呤/脱嘧啶(AP)位点.并切割AP位点5端的第一个磷酸二酯键,产生3'羟基和5'脱氧核糖磷酸末端;另外;该酶还具有3'二酯酶活性,可以从DNA3'末端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖5' -磷酸和磷酸;与此同时该酶还具有3'-5'的外切酶活性。

UDG

 UDG酶,即Uracil - DNA Glycocasylase,尿嘧啶-DNA糖基化酶, 最早由美国科学家Lindahl在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中发现,可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶。UNG酶对RNA无活性,主要应用于PCR扩增产物的防污染。保证扩增结果的准确性。

反转录酶M-MLV

 M-MLV逆转录酶来源于莫罗尼鼠白血病病毒(Moloney Murine Leukemia Virus)的逆转录酶,是一种依赖RNADNA聚合酶,缺少3’→5’的核酸外切酶活性,通过突变去除了RNaseH活性。该酶可利用RNAcDNA合成)或ssDNA作为模板,合成一条互补的DNA链,可应用于第一链cDNA合成、第二链cDNA合成、RNA引物延伸、RT-PCRRT-qPCRcDNA文库构建等。

Taq

Taq DNA聚合酶是第一个被发现的热稳定DNA聚合酶,分子量65kD,来源于水生栖热菌(Thermus aquaticusYT-1),该酶具有5’→3’的聚合酶活性和双链特异性5’→3’的核酸外切酶活性。此酶能耐高温,在70℃反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%;在分子克隆中Taq DNA聚合酶可用于DNA序列测定并可利用聚合酶链式反应(polymerase chain reactionPCR)对DNA的特定片段进行体外扩增。在PCR过程中,由于Taq DNA聚合酶在变性步骤中(约94℃)不失活,可直接进入第二轮循环,因此不必每轮循环时重新加入新酶,这使得Taq DNA聚合酶成为PCR反应中的独特用酶。

热启动Taq

HotStart Taq DNA Polymerase(exo-)是一种创新型的抗体修饰的热启动酶。该聚合酶经改造后不具有外切酶活性。该酶在室温下活性被完全封闭,避免了在样品准备及第一循环反应升温阶段产生非特异性扩增和引物二聚体,增加了DNA扩增的特异性。加热到70℃,结合在酶上的抗体迅速失活,且不会影响之后的Taq DNA聚合酶反应。热启动Taq酶无需长时间的变性,在第一循环的变性步骤中即可完全失活,另外该酶具有特异性好、灵敏度高、重复性好、扩增效率高等优点。

Pfu

Pfu聚合酶( Pfu DNA polymerase),是在嗜热的古核生物火球菌属中发现的一类能在体内进行DNA复制的酶。该酶同时具有5'-3'聚合酶活性和3'-5'外切核酸酶活性,因此在聚合反应中可纠正错误配对的碱基, 是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率最低的DNA聚合酶。因此,在体外使用Pfu聚合酶也可以快速,高保真的扩增DNA片段。其PCR产物为平端,可加A处理再与T载体连接或使用平末端克隆载体。可用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析(SNP)和末端补平等。

等温扩增Bst DNA聚合酶

Bst DNA聚合酶 ( Bst DNA polymerase ) E.c oli菌株产生 ,含有来自Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的基因,该基因缺失了5 '→3 '外切核酸酶结构域,但有5 ' →3 'DNA聚合酶活性,不具有5 '→3 '外切核酸酶活性。Bst DNA聚合酶具有较强的热稳定性 和链置换活性,被广泛地用于富含GC碱基对的DNA测序、纳克级含量DNA模板的快速测序、DNA的等温扩增、多重链置换扩增(multiple displacement amplificationMDA)和全基因组扩增(whole genome amplificationWGA)。此外,Bst DNA聚合酶还能启动模板依赖的DNA合成,在3 '末端随机添加核苷酸。以Bst DNA聚合酶为基础而开发的核酸等温扩增检测技术得到了迅猛的发展,正逐步在分子生物学、医学、法学、食品检验领域广泛应用。

IVD

体外诊断,即 IVDIn Vitro Diagnostic),是指在人体之外,通过对人体样本(各种体液、细胞、组织样本等)进行检测而获取临床诊断信息,进而判断疾病或机体功能的产品和服务的。其中酶是体外诊断应用最为广泛的核心生物原料,包括酶、辅酶、酶底物,如辣根过氧化物酶、抗坏血酸氧化酶、蛋白酶 K等,广泛用于生化诊断、免疫诊断、分子诊断、微生物诊断、血液诊断、POCT(即时检验)等几乎所有的体外诊断子领域。

Cas9 

Cas9核酸酶来源于S. pyogenes,是依赖于RNA介导的内切核酸酶,可以特异地切割双链DNA(在DNA PAM存在的情况下,也可以切割单链DNA或单链RNA)。Cas9切割位点位于目标序列( target sequence)内,离PAM(NGG)区3个碱基。PAM对于Cas9的识别和切割都是必需的。因为反应需要添加RNA (sgRNA或者crRNA:tracrRNA),整个体系,包括Cas9酶都必需不含任何核酸酶。

 

Cas12a 

Cas12a是第二类(V型)用于编辑哺乳动物基因组的CRISPR-Cas系统。Cas12a具有独特的功能,可以与CRISPR-Cas9系统进行互补。Cas12a ( Cpf1) 蛋白具有类似于Cas9RuvC内切核酸酶结构域。此外,Cpf1不具有HNH内切酶结构域,并且Cas12aN-末端不具有Cas9α-螺旋识别叶。Cas12a执行剪切后的DNA双链断裂引入了45个核苷酸突出的粘性末端,研究表明LbCas12a-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA的结合释放出强大的非特异性ssDNA反式切割活性。这促使Cas 12a可以作为一种新型的基因检测和成像的工具。

 

Cas13a 

Cas13aVICRISPR-Cas系统效应蛋白,含有2个高等真核生物和原核生物核苷酸结合higher eukaryotes and prokaryotes nucleotide-binding, HEPN)结合域,是具有RNA介导的RNA酶切活性,是目前第二大类CRISPR-Cas系统发现的唯一能够降解RNA的蛋白,对开发研究RNA工具,扩展CRISPR系统在基因编辑方面的运用具有重大价值。CRISPR-Cas13a可以用于RNA病毒检测,更重要的是可以用于新型冠状病毒试剂盒研发。


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